| # | Оригинал (английский) | Перевод (русский) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1 | Сожалеем, но текст оригинала доступен только зарегистрированным пользователям. | |||
| 2 | ||||
| 3 | ||||
| 4 | ||||
| 5 | ||||
| 6 | ||||
| 7 | ||||
| 8 | ||||
| 9 | 0— Давать краткое описание этапам подготовки образцов к визуализа-
ции под световым микроскопом; (Donatello) | |||
| 10 | 0Распознавать наиболее распространенные методы гистологического окрашивания, в том числе его основной принцип, цветовую гамму, какие компоненты клетки подходят для окрашивания, как разные красители дают представление о строении и функционировании клеток и тканей: (Donatello)
| |||
| 11 | ||||
| 12 | ||||
| 13 | 0• Иллюстрировать примерами, как обработка ткани влияет на ее внешний вид и что данные особенности говорят о структуре и функционировании клеток или тканей конкретного среза (Donatello)
| |||
| 14 | 0— Подбирать наиболее подходящие методы гистологического анализа (тип микроскопа и краситель) для исследования.
(Donatello) | |||
| 15 | ||||
| 16 | ||||
| 17 | 0Визуализация мелких образцов, которые не видны невооруженным глазом, осуществляется с помощью микроскопа. И хотя цифровая микроскопия постепенно вытесняет традиционную в качестве наиболее предпочтительного метода гистологических исследований, но понимание того, как работает оптического микроскоп все еще остается полезным навыком при анализе и образцов с предметного стекла, и их оцифрованных изображений. Ниже приведено краткое описание классического микроскопа, которое может незначительно отличаться от его других модификаций.
(Donatello) | |||
| 18 | 0Световой микроскоп предназначен для увеличения изображения ткани, размещенной на предметном стекле (Рис. 1.1). Свет от источника освещения (лампы) фокусируется посредством конденсора, проходит изначально сквозь образец на предметном столике, а затем — сквозь систему линз (объективов и окуляра), увеличивая изображение среза. (Donatello)
| |||
| 19 | 0На Рис.1.1 головка (синий квадрат) развернута в противоположную от пользователя сторону для удобства хранения. Ослабив фиксирующий винт в основании головки можно ее повернуть. Наилучший подход к изучению изображения под микроскопом — поворот головки на 180°. И обратно, когда микроскоп не используется. (Donatello)
| |||
| 20 | 0Предметное стекло с образцом фиксируется на столике специальными держателями или зажимами. Механизм передвижения столика по осям X-Y может смещать его в направлении вперед-назад или вправо-влево, что позволяет изучить образец под разными углами.
(Donatello) | |||
| 21 | ||||
| 22 | 0Для настройки яркости освещения имеется кнопка включения- выключения подсветки и регулятор яркости. (Donatello)
| |||
| 23 | 0Конденсор фокусирует исходящий от лампы свет прежде, чем он достигнет образца. С помощью специального регулятора высоту конденсора можно менять. При работе с большинством предметных стекол конденсор должен находится ниже их на 1 мм.
(Donatello) | |||
| 24 | 0После того, как свет пройдет через образец на предметном стекле, его изображение увеличивается с помощью двух объективов. Как правило, на револьверной головке микроскопа есть 3-4 нижних объектива (турелей), которые можно чередовать для получения желаемого размера изображения. Верхний объектив называется окуляром (см. ниже). Увеличенное изображение получается путем комбинирования верхнего и нижних объективов. Для удобства использования, а также во избежание повреждения объективов и стекол, всегда следует начинать работу с объектива с наименьшим увеличением (кратностью 4х). Взяв образец в фокус, можно постепенно переключаться на большее увеличение (кратностью 10х, 40х и 100х). (Donatello)
| |||
| 27 | ||||
| 28 | 0Фокусировка образца происходит с помощью регуляторов, поднимающих и опускающих столик. Регулятор грубой фокусировки перемещает столик быстрее, и его следует использовать только при низком увеличении. Взяв изображение в фокус, нужно переключиться на объектив с большим увеличением и использовать регулятор точной фокусировки.
(Donatello) | |||
| 29 | 0И, наконец, окуляры — как правило, 10-кратные — также увеличи- вают изображение. При исследовании образца следует использовать оба глаза во избежание возникновения многочисленных головных болей. Одной из важных особенностей окуляров является возможность на- стройки межзрачкового расстояния, которое на микроскопе регулируется под расположение глаз того, кто им пользуется. (Donatello)
| |||
| 31 | 0Помните, что для этого у одних микроскопов имеется отдельный регулятор межзрачкового расстояния, у других — можно двигать сами окуляры. (Donatello)
| |||
| 32 | 0Еще одна важная настройка отвечает за то, чтобы оба глаза видели изображение в фокусе. Один из окуляров обычно снабжен регулятором диоптрий, который меняет для него фокальную плоскость. Для этого закройте глаз, который смотрит в окуляр, требующий настройки (на Рис. 1.1 это левый глаз), и корректируйте изображение во втором окуляре («с фиксированным фокусом») с помощью регуляторов грубой и тонкой фокусировки до тех пор, пока оно не станет четким. Затем закройте другой глаз и настраивайте фокусировку на первом окуляре с помощью регулятора диоптрий, пока изображение также не приобретет четкие черты.
(Donatello) | |||
| 34 | ||||
| 35 | 0Оптические микроскопы веками применялись для изучения образцов на предметных стеклах и до сих пор используются многими практикующими врачами и учеными. Однако цифровая микроскопия становится все более востребованной и уже является стандартом, который во многих школах применяется для гистологических исследований. (Donatello)
| |||
| 37 | 0Для создания цифровых слайдов изображений предметные стекла с образцами сканируются в слайд-сканере. Полученные данные могут храниться в нескольких форматах, но просматривать оцифрованные изображения можно с помощью любого компьютера (Рис. 1.2). Управление очень интуитивно и понятно. Так, чтобы переместить слайд, его достаточно перетащить мышью. Если у нее есть колесико прокрутки, его можно использовать (иногда в сочетании с клавишей Ctrl) для измене- ния размера изображения. Или же использовать меню (обведено кружком на Рис. 1.2). В правом верхнем углу показано отсканированное изображение слайда. Прямоугольником выделена та область, которая в данный момент видна на экране, и ее размер меняется в зависимости от степени увеличения. Каждая система для оцифровки слайдов имеет свои отличия. Их функциональность варьируется в зависимости от операционной системы, типа мыши и других настроек компьютера. Исследование — лучший метод познания.
(Donatello) | |||
| 40 | ||||
| 41 | ||||
| 42 | 0В классическом оптическом микроскопе изображение увеличивается путем умножения кратности линз объективов и окуляров. Степень увеличения объектива можно выбирать самому, а вот окуляры, как правило, имеют 10-кратное увеличение. Если в револьверной головке стоит 40-кратный объектив, то максимально изображение увечится в 400 раз (40 х 10). (Donatello)
| |||
| 43 | 0При создании цифровых слайдов используются только объективы, аналогичные тем, что установлены в оптическом микроскопе. В зависимости от системы цифровой слайд может иметь панель масштаба, которая определяет величину изображение. Чтобы ее изменить, достаточно навести курсор мыши на панель и отредактировать масштаб с помощью колеса прокрутки. Как правило, таким способом можно максимально увеличить изображение в 20 или 40 раз. Тут можно подумать, что масштабирование цифровых слайдов сильно уступает оптическим микроскопами. Но не стоит забывать, что в последнем изображение проецируется через крошечные окуляры, в то время как цифровые слайды отображаются на больших компьютерных мониторах с высоким разрешением. (Donatello)
| |||
| 44 | ||||
| 45 | 0Существуют и другие виды микроскопов для визуализации клеток и тканей (например, фазово-контрастный, конфокальный), которые выходят за рамки данной публикации. Но об одном из них —просвечивающем электронном микроскопе —все же стоит упомянуть. Основные принципы работы схожи со световой микроскопией за исключением того факта, что вместо света через образец проходит пучок электронов. Изображение имеет большее увеличение и разрешение, чем под оптическим микроскопом. Анализ электронных микрофотографий будет рассмотрен в следующей главе. (Donatello)
| |||
| 46 | ||||
| 47 | 0Прежде чем приступать к углубленному изучению гистологии, стоит начать со схемы одиночной клетки (Рис. 1.3). Хотя в этой книге подробно не затрагиваются темы цитологии (на молекулярном уровне), общая структура и функции компонентов клетки будут описаны в последующих главах. На данный момент следует знать, что:
(Donatello) | |||
| 48 | 0— Внешняя клеточная мембрана — плазматическая мембрана —
отделяет содержимое клетки от внеклеточного матрикса. (Donatello) | |||
| 49 | ||||
| 50 | ||||
| 51 | ||||
| 52 | ||||
| 53 | ||||
| 54 | ||||
| 55 | ||||
| 56 | ||||
| 57 |