| Английский оригинал | Перевод на русский | |||
|---|---|---|---|---|
Сожалеем, но текст оригинала доступен только зарегистрированным пользователям. | Свободные рибосомы Mikelangelo 12.02.23 в 16:04 | |||
Внеклеточный матрикс Mikelangelo 12.02.23 в 16:05 | ||||
Ядрышко Ядро (ядерная мембрана) Donatello 12.02.23 в 18:00 | ||||
Ядерные поры Donatello 12.02.23 в 18:01 | ||||
Лизосома Mikelangelo 12.02.23 в 16:06 | ||||
Комплекс Гольжи Mikelangelo 12.02.23 в 16:06 | ||||
Гладкий эндоплазматический ретикулум Mikelangelo 12.02.23 в 16:08 | ||||
Митохондрия Mikelangelo 12.02.23 в 16:08 | ||||
Шероховатый эндоплазматический ретикулум Mikelangelo 12.02.23 в 16:10 | ||||
Рис. 1.4 Печень: клетки (зеленый контур) и ядра (синие стрелки). Mikelangelo 12.02.23 в 8:38 | ||||
расположенная вокруг ядер и преимущественно над ними, является цитоплазмой. Плазматическая мембрана между клетками по большей части не просматривается, за исключением отдельных областей (черные стрелки). Donatello 12.02.23 в 18:04 | ||||
Рис. 1.3 Упрощенная схема типичной клетки. Mikelangelo 12.02.23 в 8:40 | ||||
На Рис. 1.4 увеличенное изображение печени. С него удобно начать знакомиться с гистологией, поскольку все клетки печени четко выражены (пример выделен зеленым пунктиром). Donatello 12.02.23 в 19:38 | ||||
Наиболее заметной органеллой клетки, которую можно легко увидеть в оптический микроскоп, является ядро (Рис. 1.4, выделено синими стрелками). На этом слайде оно имеет синеватый оттенок. Остальное содержимое клетки (на слайде имеет розовато-фиолетовый оттенок) — это цитоплазма. Внутри нее органеллы слишком малы, чтобы их можно было визуализировать с таким разрешением. Donatello 12.02.23 в 19:38 | ||||
Вещество между клетками называется внеклеточный матрикс. Однако состав этой бледно-розовая ткани в печени (и других органах) имеет более сложную структуру, поскольку включает в себя кровенос- ные сосуды, которые в свою очередь тоже состоят из клеток, и другие элементы соединительной ткани (подробнее об этом написано далее). Donatello 12.02.23 в 19:38 | ||||
У клеток на Рис. 1.4 четко видны их границы. Однако это скорее исключение из правил. На участке ткани между зелеными скобками (Рис. 1.5) находится приблизительно от 30 до 50 клеток, в зависимости от количества учитываемых ядер (одно выделено синими стрелками). Розовая область, Donatello 12.02.23 в 19:39 | ||||
Рис. 1.5 Участок кишечника. Видны от 30 до 50 клеток эпителия (зеленые скобки), одиночная клетка (пунктир), граница между двумя клетками (черные стрелки), ядро (синие стрелки). Donatello 12.02.23 в 19:40 | ||||
Рис. 1.6 Глотка. Видны эпителий (зеленые скобки) и соединительная ткань (желтые стрелки). Donatello 12.02.23 в 19:40 | ||||
Рис. 1.7 Схема образца ткани в фиксирующем растворе. Donatello 12.02.23 в 19:41 | ||||
На Рис. 1.6 показано другое изображение для практики. Область между зелеными скобками заполнена более чем сотней клеток. Большинство из них имеют кубическую (квадратную) или округлую форму. Как правило, границы между большинством клеток отчетливо видны, особенно на среднем и верхнем участках снимка. В тех местах, где границы клеток не видны, рекомендуется мысленно их прорисовывать. Donatello 12.02.23 в 19:41 | ||||
1.3.2 Заливка Donatello 12.02.23 в 19:42 | ||||
Поскольку образцы органов и других тканей могут быть разных форм и размеров, после фиксации они заливаются специальной средой для более удобного использования и резки. В результате материал оказывается внутри твердого блока из заливочной среды (Рис. 1.8). Donatello 12.02.23 в 19:48 | ||||
1.3 Подготовка образцов Donatello 12.02.23 в 19:49 | ||||
Для изучения гистологии необязательно полностью знать все детали процесса подготовки исследовательского материала. Однако общее понимание процедуры облегчит интерпретацию гистологических срезов. Donatello 12.02.23 в 19:49 | ||||
Четыре основных этапа подготовки образцов: Donatello 12.02.23 в 19:49 | ||||
1. Фиксация Donatello 12.02.23 в 19:49 | ||||
2. Заливка Donatello 12.02.23 в 19:49 | ||||
3. Резка Donatello 12.02.23 в 19:49 | ||||
4. Окрашивание Donatello 12.02.23 в 19:49 | ||||
1.3.1 Фиксация ткани Donatello 12.02.23 в 19:50 | ||||
С помощью фиксации останавливают метаболизм клеток и предотвра- щают разложение тканей. Это достигается посредством реагентов, которые приводят к формированию перекрёстных сшивок белков (химическая фиксация). На Рис. 1.7 показано схематическое изображение сердца, погруженного в фиксирующий раствор. Donatello 12.02.23 в 19:50 | ||||
Химическая фиксация занимает много времени и разрушает структуру белка. В случаях, когда сроки ограничены, а активность ферментов нужно сохранить, используется метод быстрой заморозки. Это процедура, при которой ткань вместо химического фиксатора погружают в жидкий азот. Donatello 12.02.23 в 19:50 | ||||
Рис. 1.8 Образец ткани в заливочной среде. Donatello 12.02.23 в 19:51 | ||||
Рис. 1.9 Схематическое изображение проникновения заливочной среды в ткань. (а) Среда не проникла в ткань. (б) Среда полностью проникла в ткань. Donatello 12.02.23 в 19:51 | ||||
Рис.1.11 Неокрашенная ткань. Donatello 12.02.23 в 19:51 | ||||
Рис. 1.10 Резка ткани. Donatello 12.02.23 в 19:51 | ||||
Клетки печени на Рис. 1.12 были окрашены гематоксилином и эозином. Обратите внимание, что, окрашивая отрицательно заряженные молекулы ДНК, гематоксилин придает ядру синий цвет (обозначено стрелками), в то время как эозин окрашивает белки в цитоплазме в красно-розовый. Белки во внеклеточных областях (обозначено пунктиром) также являются эозинофилами. Donatello 12.02.23 в 19:53 | ||||
Рибосомы — это клеточные структуры в цитоплазме, которые синтезируют белок. Поскольку они содержат базофильную РНК с отрицательным зарядом, клетки, активно синтезирующие большое количество белка, демонстрируют частичное Donatello 12.02.23 в 19:54 | ||||
окрашивание гематоксилином отдельных участков цитоплазмы. Это добавляет к ее обычному розовому цвету синий, придавая цитоплазме темно-фиолетовый оттенок. Это явление называется цитоплазматической базофилией. Donatello 12.02.23 в 19:54 | ||||
На Рис. 1.13 изображение поджелудочной железы, окрашенной гематоксилином и эозином. В поджелудочной железе и других органах скопления нескольких Donatello 12.02.23 в 19:57 | ||||
клеток называются ацинусами (черный пунктир, Рис. 1.13). Большая часть клеток в ацинусе имеет пирамидальную форму (желтый пунктир). На этом изображении у большинства клеток наблюдается цитоплазматическая базофилия, особенно в областях вокруг ядер. Две клетки с Donatello 12.02.23 в 19:58 | ||||
интенсивной цитоплазматической базофилией обозначены желтыми стрелками. Donatello 12.02.23 в 19:58 | ||||
1.3.3 Резка Donatello 12.02.23 в 19:58 | ||||
После заливки из ткани изготавливают тонкие (толщиной 5-15 мкм) срезы на микротоме, которые размещают на предметных стеклах (Рис. 1.10). На Рис. 1.10 показаны только три среза, но из одного образца можно получить сотни срезов. Donatello 12.02.23 в 19:58 | ||||
Этот процесс называется последователь- ной резкой, поскольку все срезы создаются из одного и того образца ткани. Donatello 12.02.23 в 19:59 | ||||
1.3.4 Окрашивание Donatello 12.02.23 в 19:59 | ||||
Через окрашивание улучшают визуализацию клеточных компонентов. Для этого существует специальный ряд процедур, и каждая выделяет разные элементы клеточной структуры. Donatello 12.02.23 в 20:00 | ||||
Процедуры варьируются от относительно неселективного окрашивания на основе заряда клеточных компонентов до крайне специфического метода, зависящего от антитело-антиген реакции. Donatello 12.02.23 в 20:00 | ||||
На Рис. 1.11 изображено предметное стекло со срезом кишечника, который либо не окрашен, либо окрашен, но очень плохо. Этот рисунок дает представление о том, как выглядит неокрашенная ткань. Donatello 12.02.23 в 20:01 | ||||
В следующих параграфах представлены две самые распространен- ные технологии окрашивания: Donatello 12.02.23 в 20:01 | ||||
| Непереведённых символов: 0 | ||||